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常用缓冲溶液注射级氨丁三醇的配制方法

更新时间:2023-08-22   点击次数:487次

常用缓冲溶液注射级氨丁三醇在生物化学研究中使用较广泛的一种缓冲剂,它的常用有效pH范围是在“中性"范围,如:Tris缓冲液:pH=7.5~9 Tris-HCl缓冲液:pH=7.5~8.5 Tris-磷酸盐缓冲液:pH=5.0~9.0

1. 某一特定pH值的0.05mol/L Tris缓冲液的配制:将50ml 0.1mol/L Tris碱溶液与下表所示相应体积(单位:ml)的0.1ml/L HCl混合,加水将体积调至100ml。


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Tris-HCl缓冲液的两种配置方法

第一种方法是分别配制0.05 mol/L Tris和0.05 mol/L HCl溶液,然后按常用表中所列体积混合即可。

但是由于标准浓度的稀盐酸不易配制,所以常用另一种方法:以配置1 L 0.1 mol/L的Tris-HCl缓冲液为例:先称12.11 g Tris碱溶于950 mL~970 mL 去离子水中,边搅拌边滴加4 N HCl,用pH计测定溶液pH值至所需的pH值,然后再加水补足到1 L。

其他Tris衍生缓冲液

除了Tris-HCl之外,Tris还有多种衍生缓冲液:

TBS=Tris-HCl+ NaCl+KCl,常用于清洗免疫染色的组织或Western Blotting中的蛋白印迹膜等;

TBST=Tris-HCl+NaCl+tween20,做Western Blotting中常用的一种洗膜缓冲液;

TE=Tris-HCl+EDTA,对DNA的碱基有保护性,常被用于DNA的稳定和储存;

TAE=Tris base+乙酸+EDTA,是大片段DNA短时间电泳时广泛使用的缓冲系统;

TBE=Trisbase+硼酸+EDTA,适用于长时间DNA电泳,对较小片段分离效果较好。

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