生物缓冲剂在生物化学研究中有着重要的意义,在免疫印迹、生物芯片及生物杂交等实验及体外诊断、生物医药等行业中的应用非常多。
生物缓冲剂系统包含几十个品种。典型品种如Tris、HEPES等。本文将介绍Tris缓冲剂使用注意事项。
注意事项:
1.Tris缓冲液的pH值受温度影响大,△pKa/℃=-0.031 ,例如:4℃时缓冲液的pH=8.4,则37℃时的pH=7.4,所以一定要在使用温度下进行配制,室温下配制的Tris-HCl缓冲液不能用于0℃~4℃。
2.Tris缓冲液对某些pH电极发生一定的干扰作用,需使用与Tris溶液具有兼容性的电极;
3.Tris缓冲液的pH值受溶液浓度影响较大,缓冲液稀释十倍,pH值的变化大于0.1
4. 吸入,摄入,皮肤吸收Tris可造成伤害,操作时需戴好手套和护目镜;
5. Tris缓冲液易吸收空气中的CO2,配制的缓冲液要注意盖严密封;
6. Tris在一定程度上与各种分子反应,包括RNA酶抑制剂,醛,酶,DNA以及常见金属如Cr3+,Fe3+,Ni2+,Co2+和Cu2+等,在有些系统中会起抑制作用,在配制过程中需考虑与其他组分之间的相互作用;
7. Tris缓冲液不适用于BCA测定;
8. 作为蛋白缓冲液时,若后续工作需要质谱,则不适宜用Tris,较好换成其他质谱仪可耐受的缓冲液。
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